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下调miRNA-21表达对人结肠癌HCT116细胞体外生长的影响
【出 处】:
miRNA-21
结肠癌
真核表达
【作 者】:
陶弋婧
[1] ;
赵娟娟
[1] ;
李永菊
[1] ;
郭萌萌
[1] ;
周涯
[2] ;
秦娜琳
[1] ;
郑静
[1] ;
罗军敏
[1] ;
徐林
[1]
【摘 要】研究下调miRNA-21表达对人结肠癌HCT116细胞体外生长的影响。利用反义核酸技术设计针对miRNA-21成熟体的ASO序列,构建pcDNA-6.2-miRNA-21-ASO真核表达载体(命名为p-miR-21-ASO);将重组载体p-miR-21-ASO体外瞬时转染HCT116细胞,real-time PCR检测细胞中miRNA-21的表达变化;CCK-8法及克隆形成实验检测HCT116细胞的增殖及克隆形成能力改变;划痕法观察HCT116细胞的体外迁移能力变化;western blot检测细胞中VEGF蛋白的表达变化。结果显示,p-miR-21-ASO载体能下调miRNA-21的表达(P〈0.05);CCK-8及克隆形成实验结果显示HCT116细胞的增殖及克隆形成能力明显下降(P〈0.05);划痕实验结果发现细胞的体外迁移能力削弱(P〈0.05);western blot检测结果表明转染组细胞VEGF表达下调(P〈0.05)。结果表明,下调miRNA-21能明显抑制HCT116细胞的体外生长,这可能与VEGF的表达降低有关。
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