联系我们
scFvOD20:sTRAIL蛋白诱导BJAB细胞凋亡的实验研究
【出 处】:
【作 者】:
杨雨琪
[1] ;
张晓龙
[2] ;
张砚君
[2] ;
吕军强
[1] ;
孙睿声
[1] ;
安鹏姣
[1] ;
于楠楠
[1]
【摘 要】研究融合蛋白scFvCD20:sTRAIL诱导B淋巴瘤细胞BJAB凋亡的发生以及凋亡相关蛋白的表达变化。采用PCR、重叠PCR、酶切、连接等方法构建pLentiR.scFvCD20:sTRAIL、pLentiR,ISZ-sTRAIL,pLentiR.scFvCD20及pLentiR.CopG—FP慢病毒表达载体,瞬时转染293T细胞获得含有scFvCD20:sTRAII。融合蛋白的细胞培养上清,采用CCK8细胞增殖抑制实验检测scFvCD20:sTRAIL融合蛋白对CD20阳性NAB细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测其对BJAB细胞诱导凋亡,Westernblotting检测凋亡过程中内源性及外源性凋亡信号传导途径相关蛋白的变化。结果显示,成功构建了慢病毒表达载体pLentiR.scFvCD20:sTRAIL、pLentiR.ISZ-sTRAIL、pLentiR.scFvCD20及pLentiR.CopGFP,瞬时转染293T细胞后并可获得融合蛋白的表达。与ISZ-sTRAIL比较,融合蛋白seFvCD20}sTRAIL可不同程度地提高对CD20阳性BJAB细胞的生长抑制作用,凋亡细胞增多,其中Bcl-2表达下降、Bax表达升高,Caspase8、Caspase9、Caspase3及PARP被特异性剪切活化。研究表明,融合蛋白scFvCD20:sTRAIL可诱导BJAB细胞凋亡,与bcl-2/bax的表达变化以及Caspase的剪切活化有关。
相关热词搜索:
上一篇:炎症状态下NF—KB—mTOR通路及转录因子RUNX1调控肾小管上皮细胞DC—SIGN表达研究
下一篇:MEKK2在类风湿关节炎患者中的表达及临床意义